乌兹别克斯坦铁路（乌兹别克语：Oʻzbekiston Temir Yoʻllari）是中亚国家乌兹别克斯坦的国家营运铁路交通系统，是该国国内唯一的铁道经营者。乌兹别克斯坦铁路在该国独立后承接大部分苏联时期的乌境内铁道产物，铁路总长度约3,645公里，该单位目前共聘请54,700名员工。

乌兹别克斯坦铁路史自1880年建造中亚铁路开始，并于1888年开始营运自现今土库曼斯坦的土库曼斯坦纳巴德越过阿姆河进入萨马尔罕的铁路。经过持续的建设后，铁路于1899年通车到达首都塔什干，同年辟建经过费尔干纳盆地至安集延的支线。1906年外阿拉尔铁路开通，使得塔什干成为俄罗斯帝国境内来往东西的中心点。1970年代开通经过境内卡拉卡尔帕克斯坦共和国通往哈萨克斯坦的铁路，也因此能够连接通往欧洲的铁路。

乌兹别克斯坦独立后，大部分的对外往来都必须经由邻国的铁路，并且仍在持续新建更多支线。除此之外，乌兹别克斯坦于2011年开始营运塔什干-萨马尔罕高速铁路。

自2004年开始运行，由电气机关车牵引与六人一室不锈钢冷房车6节车厢编成的。主要来往于乌国国内两大城，塔什干与萨马尔罕。该列车的名字由萨马尔罕广场命名，在乌兹别克语中是“沙漠中的场所”的意思。

同样是来往乌国两大城的城际列车，中途经由第三大城布哈拉，近年透过翻新的方式使其寿命延长。

从2011年10月8日开始运行的高速铁路系统。列车的命名是来自于13世纪被成吉思汗领导的蒙古帝国所毁灭的Afrasiyab城。从首都塔什干至萨马尔罕344公里的路程仅需2.5小时即可到达。列车是自西班牙进口的RENFE高速列车（英语：RENFE Class 130）。